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液相色谱仪常见故障断定及解决方法

发布时间:2016-09-30      点击次数:1784
   液相色谱仪常见故障断定及解决方法
  液相色谱仪一直以来就备受广大实验室爱好者的宠爱,操作简单、、结果。今天我们就来具体介绍一下液相色谱仪常见的故障的解决方法,希望可以帮助用户更好的应用产品,希望可以帮助用户更好的应用产品。
  (一)液相色谱仪保留时间变化
  1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱
  2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
  3.缓冲液容量不够用>25mmol/l的缓冲液
  4.柱污染每天冲洗柱
  5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相
  6.柱快达到寿命采用保护柱
  (二)液相色谱仪保留时间缩短
  1.流速增加检查泵,重新设定流速
  2.样品超载降低样品量
  3.键合相流失流动相ph值保持在3~7.5检查柱的方向
  4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀
  5.温度增加柱恒温
  (三)液相色谱仪保留时间延长
  1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
  2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
  3.键合相流失同前(二)3
  4.流动相组成变化同前(二)4
  5.温度降低同前(二)5
  (四)液相色谱仪出现肩峰或分叉
  1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%
  2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂
  3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
  4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
  5.进样器损坏更换进样器转子
  (五)液相色谱仪鬼峰
  1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
  2.样品中未知物处理样品
  3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)
  4.三氟乙酸(tfa)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂
  5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用hplc级的水
  (六)液相色谱仪基线噪声
  1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压
  2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用hplc级试剂
  3.检测器灯连续噪声更换氘灯
  4.电干扰(偶然噪声)采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)
  5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压
  (七)液相色谱仪峰拖尾
  1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相
  2.峰干扰清洁样品,调整流动相
  3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相ph值,钝化样品
  4.同前(四)4
  5.同前(四)3
  6.死体积或柱外体积过大连接点降至zui低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管
  7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱
  (八)液相色谱仪峰展宽
  1.进样体积过大同
  2.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散
  3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点
  4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣*峰半宽的10%
  5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相
  6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器
  7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
  8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小
  9.样品过载进小浓度小体积样品
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